Ut materia auxiliaris in experimentis deprehensionis ELISA, enzyme laminam munus decisivum agit et directe afficit eventus experimentales finales. Quales sunt Enzyme laminam maxime pendet a sensibilitate ad dapibus adsorptionis, differentiae interdum adsorptionis capacitatis inter laminas et foramina, et differentia inter batches acquisiti. enzyme laminam . Ideo eligens an enzyme laminam Productum cum dapibus altum sensitivum adsorptionis, parva differentia inter foramina capacitatis interdum adsorptionis, et parva differentia inter batches est cautio experimentorum ad certos et stabiles eventus experimentales obtinendos.

Enzyme laminam divisio : secundum diversa signa ; ad laminam est diuersarum generum.

1: Secundum numerum foraminum, dividi potest in 96 foramina, 48 foramina, etc enzyme laminam maxime usus est cum microlaminam lectorem plate metrum in foro ad summum 96 foramina, sic microplata 96 perforata est.

2: Secundum diversa extrema, dividitur in fundum planum, U fundum, V fundum, etc.

Index refractivus basi planae humilis est, qui in microplate deprehendendi aptus est;

T ipse U index refractivus microplate altus est, ad sampling, sampling, et miscere, et potest directe observare colorem mutare sine posito in microplate, ut determinet utrum sit reactio immunis debita.

Microplate V basis accurate specimen absorbere potest.

3: Secundum varias facultates ligandi microplatis et interdum et alia molecularum, dividitur in vim obligandi altam, vim obligandi medium, et aminationem.

(1) Princeps vim obligandi

Post superficiem huius microplatis, facultas ligandi interdum valde augetur, usque ad 300~400ng IgG/cm2, et pondus hypotheticum dapibus praecipui vincti est> 10 kD. Usus huius generis microplatis sensum emendare potest, et intentionem ac quantitatem interdum comparationem adopertum reducere potest, quod facilius motus non specificas producere potest. Cum antigeno vel anticorpore, purgat non-ionica, non potest efficaciter signare locum dapibus soluti, et interdum utendum est ut agentis sealantis.

(2) Medium vis binding

Tales laminae microplatae patienter ligant interdum per vincula hydrophobica in superficie, et baiulatores solido-phasi aptiores sunt ad servo macromolecular cum pondere hypothetico> 20 kD, cum capacitate ligandi interdum 200 ad 300 ng IgG / cm2. Ob notas solius ligationis ad macromoleculas, convenit vectoribus solidis elementorum vel antigenorum purificatum reducere potentialem ad reactivitatem crucis non specificae. Patina interdum iners esse potest vel nonionicum purgat ut solutionem obsignatio.

(3) Aminatio

Haec microplata post modificationem superficiei coetus positive amino accusatum habet, cuius vinculum hydrophobicum vinculo hydrophilico substituitur. Hoc genus microplatis idoneum est ut tabellarius solidi phase pro servo minimo-moleculi. Apto quiddam et pH utens, superficies ligatur ad negationem onerariis moleculis per vincula ionica. Ob proprietates hydrophilicas superficiei eiusque facultatem covalenter ab aliis nexibus affixis ligari, adhiberi potest ut interdum moleculas solubiles in agentibus decontaminationibus figere ut Triton-100, Tween 20, etc. propter hydrophobicitatem redegit; praeterea superficies efficaciter claudi debet. Propter proprietates superficiei hydrophilicas et covalentis, solutio adhibita signatio adhiberi potest cum aliqua coetus functionis functionis in amino globi non reactivo et crosslinker delecti.

4. Secundum colorem dividi potest in diaphanum, nigrum, et album.

Perspicuus est communius pro experimentis immunizationibus enzyme connexis generalissimis. Contra microplate perspicui, etiam microplates opacae ad deprehendendum lucidum, vulgo nigrum et album. Ipsa microplata nigra effusio levis habet, cuius signum multo minus est quam microplata alba, sic fere ad lucem validam deprehendere solet, sicut deprehensio fluorescens. Microplata alba pro levi deprehensione infirma, saepe pro chemiluminentia generali adhibetur. Praeterea microplate nigra quaestionem quoque de reactionibus non specialibus infirmare potest. Eodem tempore, interest notare quod cum microplate generali detectio luminosa esse non potest, quia lumen e reactione chemiluminiscentiae emissa est isotropica, si, cum microplate diaphano, lumen non solum e directione verticali diffunditur; sed etiam ex directione horizontali, facile per intervallum inter foramen et parietem foraminis illustrant, inde in lucem effusio valoris foraminis a proximo foramine emisso in lucem afficitur.

Bona microplate debet esse bonae adsorptionis effectus, vilis blank valor, alta pellucida foraminis fundi, et similis effectus inter laminas et inter foramina eiusdem laminae. Propter diversitatem materiae rudis et differentiam in productione processuum, qualitas variarum productorum multum differt, ergo in antecessum ante usum exsecutio uniuscuiusque massae microplati cohibenda est. Communiter inspectionis methodi sunt quaedam concentratio hominum IgG (vulgo 10 ng/ml) puteis lamminis ELISA obductis, lotis, additis congruam dilutionem enzyme-intitulatum anti-humanum Igg anticorporis unicuique bene abluentis post conservationem caloris; colori substrato addito, enzyme reactionem siste, ac solutionis absorbentiam metire in singulis bene respective. Condiciones reactionis moderatae sunt ut lectio singulorum bene conservata in absorptione circiter 0.8. Mediocris totius lectionis computabatur. Differentia inter medium omnium lectionum et omnium lectionum minus erit quam 10%. Tres sequentes microplates sunt A, B, C in exemplum.

Methodus directa: ad adsorptionem Humani Igg in superficie microplatis deprehendere

Duplex anticorpus modus Sandwici: antigenum in sero positivum pro anti-humano anticorpore

Ut ex superiore figura videri potest, in his tribus generibus enzyme tabulettae, classis A microplate meliorem effectum interdum adsorptionis habet, sed etiam adsorptionis dapibus sensibilitatem meliorem, quae certius experimentalis notitiae praebere potest. Praeterea quaerere potes de lamina massae differentiae. Sequens est massae differentiae cuiusdam laminae. Ut videri potest ex differentia chartularum intrinsecae differentiae, microplata bonum habet stabilitatem inter-batch, et coefficiens intra seges variationis (CV) differentia circa 5.0% est, quod insigniter humilius est quam coefficiens variatio intra massam. infra 10.0% in qualitate control vexillum pro reactione immune clinica. Ideo etiam experimentis ELISA convenit.