R omnis

1. fistulam gelidam e liquido NITROGENIUM aufer et statim in aquam balneum 37℃, leviter quatiens. Post liquidum liquefactum (circa 1-1.5 minutas), alcohole aliquid eximito et in mensa laboris ultra-mundanae pone.

2. Suspensionem cellulam in tubo centrifugii 15ml cum medio 10ml (tubo congelato lava cum medio et omnes cellulas parieti adhaesas ablue) et centrifugium ad 1000 per 5 minuta.

3. Supernatans versa est et 1 ml medii ad cellulas suspendendas addita est. Fumus in 10cm scutellam cum 10 ml medii et leniter sinistra et dextra excutiunt ut cellulas in disco aequaliter distribuant.

4. Animadverte genus cellae et tempus, nomen humanum, et cetera, pone illud in incubatore CO2, cellulas adhaeres et medium muta.

5. Medium semel in dies III mutabatur.

P assage

1. Plantae traductae sunt ad 80-90% coverage.

2. Abup the original medium .

3. Trypsin oportet addere (cellulas modo operias) et concoquat 1-2 minuta .

4. Concoctio terminata fuit addendo aequalem voluminis Seri continentis medium .

5. Cellulas cum fistula fistulae sclopeta pulsabis et eas omnes suspensas relinque.

6. Cellae in tubum centrifugium 15ml aspiratae et centrifugae 1000 pro 5 min.

7. Supernatantem funde et 1-2ml medie adde ut omnes cellulas sufflant.

8. Cellulae latae sunt pluribus ferculis culturae speciebus cella pendentibus. Generaliter cellulae cancer in 5 cellulas divisae sunt et tres cellulae normales transmittuntur. Perge colere.

Libere digerunt cellas et earum fabricas (ibid. supra).

Suspensionis cellulas cum solutione repono concreta congelata, eas in tubulum freezeri sterilis divide, paucis minutis quies, et genus cellulae et diem repono congelatum denota. 4℃ 30min, -20℃ 30min, -80℃ pernoctare, et deinde in liquida perfusio NITROGENIUM.

Praeparatio solutionis cryopraeservationis: 70% medium 20% FBS 10% DMSO. DMSO addenda est lente et constanter agitanda